Description
细胞核转染系统,Amaxa
Nucleofector™ Technology,Amaxa核转染系统,一直被模仿,从未被超越
简介:Nucleofector核转染技术
随着系统生物学与交叉学科方法的应用,要求细胞和系统 模型越来越接近体内细胞的功能。这就意味着将来的细胞 转染多数会是原代细胞的转染。而传统的方法很难成功转 染原代细胞。另外即使使用细胞系做为系统模型,传统的 方法也难重复出好的转染效率与成活率。Nucleofector 技术就从根本上解决这个问题。无论是原代细胞、干细胞 还是细胞系,它每次都可重复出很高的转染效率。 1998年,Nucleofector技术开发成功,2001年上市,是市场 上第*个有效的、非病毒介导的、用于原代细胞与难转染细 胞系的转染方法。现在Lonza还在继续不断改革创新,为研 究者推出更多更好的新产品。
原理:
NucleofectionTM技术是利用电击在细胞膜上穿个小孔。并且 综合优化了各种特定细胞转染程序与转染液,使得转染物质 (如DNA、RNA等)不仅可以进入细胞质,而且可直接通过核 膜进入细胞核。这使得细胞的转染效率*高可达99%。
Nucleofector技术的组成:
Nucleofector技术由Nucleofector仪器、细胞转染试剂和操作 手册组成
※ Nucleofector仪器:
1. 模块化设计,各模块可单独配置;
2. 核心模块内置各种细胞优化的电极参数,可直接选择;
3. X模块提供中低通量(1-16样),中低细胞数量(约1e+5 到1e+7)转染;
4. Y模块提供24孔板直接贴壁转染;
5. 96模块提供高通量(96样),低细胞数量(约1e+5)转染;
6. LV模块提供低通量,大量细胞直接转染 (1e+8到1e+9);
※ 试剂盒:包含有转染溶液、添加剂、专*电极杯、吸管、 阳性对照质粒。转染试剂为细胞转染提供保护,即保证了 高的转染效率与成活率,又帮助细胞维持良好的生理功能 性状。我们提供有一系列的优化转染试剂盒与操作手册。
※ 数据库与操作手册:我们的在线数据库提供600种以上细胞 的转染数据和操作手册。优化的操作手册除了操作手册除了 操作指导外,还包括细胞来源、传代、生长条件、培养基以 及转染后培养等细节技巧。
*具兼容性的模块:Nucleofector X模块
针对不同数量级的细胞,提供不同的电极杯。
X模块可以使用两种不同形式的聚合材料电极,分别是如下 电极杯和电极板条
100ul电极杯
※ 新式可导电材料的电极杯替代了原来铝制电极杯
※ 低通量但是一次可转较大量的细胞 (适用于生化应用或Western Blot实验)
16孔20ul电极板条
※ 与96孔电极杯的板条一致
※ 中通量,低细胞数量(报告基因分析,RNAi)
可在相同的条件下转不同数量的细胞
X模块使用的相同材质制成的20ul电极板条与100ul电极杯,X模块中不同的电极模式可选用相同的电转程序(系 统可自动转化应用于不同模块的参数,客户无需进行额 外操作),实现实验的方便性与灵活性最*化。 一旦其中一种电极形式优化好,另一种就很容易转化好。 不同通量的电转条件也很容易转化。 96孔模块的操作手册也适用于X模块。
贴壁转染模块 4D-Nucleofector Y Unit
至今为止基于电转的方法都是要求细胞处于悬浮状态 Nucleofector进入一个新时代,细胞可以在贴壁状态 下直接转染。细胞培养在24孔板中,插入电极板即可 完成转染。
优点:
※ 细胞生长在24孔板中,直接转染
※ 可在细胞生长的任何时期进行转染
※ 细胞活力好,转染效率最*可达70%
※ 与Clonetics原代动物神经元兼容
耗材:
根据简化试剂盒的原则,我们提供两种转染试剂AD1与AD2, 适用于所有细胞类型。试剂盒可按下图的指示进行选择:
大量细胞转染:LV模块
使用4D-Nucleofector核转系统,用于小量细胞转染的实验条件,可直接放大, 用于大量细胞的转染。
LV模块采用封闭系统,可转染1×107至1×109细胞。转染的条件可使用X模块, 以小体积进行摸索。之后再使用LV模块,不需要重新优化,即可进行大量细胞 转染。LONZA公司已进行过验证的细胞有人T细胞、CHO-S、HEK293-S和K562等。
优势:
※ 系统封闭
※ 在无菌环境下转染多达109细胞;
※ 系统可放大
※ 可用小体积优化并确定转染条件;
※ 详细的操作步骤
※ 在线数据库中收录了700多种细胞的实验条件;
※ 操作简单
※ 简单的培训即可掌握实验技术;
※ 软件系统
※ 操作软件符合21CFR part11的规定;
两种规格可选:
从小体积少量细胞直接放大到大体积大量细胞
应用:
※ 对人原代细胞进行体外基因修饰以用于细胞治疗(例如,基因编辑、生产CAR-T细胞);
※ 瞬时转染后生产治疗性蛋白或抗体,进行各种质粒的筛选;
※ 瞬时转染大量细胞后用于细胞学实验;
96孔模块
96孔模块可对原代细胞和各种细胞系提供1-96通量 的实验条件。可设置96个不同的实验条件,以得到最*的实验结果。完整的系统包含3个部分:
※ 4D核转仪(Core+X模块)来发送核转程序
※ 96-well Shuttle Device来进行96孔的核转
※ 安装96-well Shuttle Device软件的电脑, 用来控制仪器
耗材:
※ 用于原代细胞和各种细胞系的专*试剂盒
※ 对于未知条件的细胞提供优化试剂盒
优点:
※ 96个转染孔可单独设置转染程序,完成全部核转 只需不到5分钟
※ 一次核转,实验96个不同条件,完成条件优化 订购热线:4**-686-*1**
基本款:Nucleofector 2b Device
2001年推出,用于实验室研究的单管系统,低通量 有效转染质粒、RNA等不同底物到原代细胞和难转 染细胞系中。拥有4000篇以上的引用文献。
耗材:
※ 提供50多种原代细胞,血液细胞及干细胞试剂盒
※ 5种细胞系试剂盒涵盖了所有种类细胞系
※ cGMP试剂盒适用于蛋白生产应用
订货信息:
细胞核转染系统,Amaxa
- 公司名称
北京赛百奥科技有限公司
- 品牌
- 型号
Amaxa - 产地
- 厂商性质
代理商 - 更新时间
2021/2/1 11:07:00 - 访问次数
19